Análisis histopatológico y detección mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real de leptospira spp. y rhodococcus equi, en órganos de caballos (equus ferus caballus), ingresados a la unidad de morfología y diagnóstico

Abstract

Leptospira spp. y Rhodococcus equi, son bacterias que afectan a los caballos, principalmente en forma subclínica, pero son relevantes de detectar debido al potencial zoonótico. Este estudio tuvo como objetivo analizar histopatológicamente y detectar mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) la presencia de Leptospira spp. y Rhodococcus equi en órganos de caballos. Se analizaron tejidos de riñón, hígado, pulmón e intestino, pertenecientes a 18 caballos, con tinciones Hematoxilina-Eosina (H-E), Stainer-Stain (S-S), y Ziehl-Neelsen (Z-N). Además, se utilizó qPCR para identificar a los agentes. Se observaron lesiones sugerentes a Leptospira spp. con H-E en 14 tejidos, y en 1 se observaron espiroquetas con S-S, sin embargo, ninguno presentó positividad al qPCR. Por otro lado, con H-E se observaron 19 tejidos con lesiones sugerentes a Rhodococcus equi, en 3 tejidos se observaron las bacterias intracelulares ácido alcohol resistentes con Z-N y 4 fueron positivos a qPCR. Se aplicó la prueba de exacta de Fisher para relacionar los resultados. No existe asociación entre las lesiones histopatológicas con tinción H-E, ni de Leptospira spp., ni de Rhodococcus equi, con el qPCR. Tampoco existió asociación entre la positividad con tinción S-S y el qPCR, pero si lo hubo entre la tinción a Z-N y qPCR, con un p valor = 0,0351. Estos resultados permiten aceptar la hipótesis de forma parcial, ya que se pudo comprobar la presencia de Rhodococcus equi mediante histopatología y qPCR. Sin embargo, Leptospira spp. no fue detectada mediante qPCR, a pesar de la presencia de lesiones sugerentes en la histopatología.

Leptospira spp. and Rhodococcus equi are bacteria that affect horses, mainly in a subclinical form, but are important to detect due to their zoonotic potential. This study aimed to perform histopathological analysis and detect the presence of Leptospira spp. and Rhodococcus equi in horse organs using real-time polymerase chain reaction (qPCR). Kidney, liver, lung, and intestinal tissues, from 18 horses, were analyzed using Hematoxylin-Eosin (H-E), Steiner-Stain (S-S), and Ziehl-Neelsen (Z-N) stains. Additionally, qPCR was used to identify the agents. Lesions suggestive of Leptospira spp. were observed with H-E in 14 tissues, and spirochetes were detected with S-S in 1 tissue; however, none tested positive by qPCR. On the other hand, 19 tissues showed lesions suggestive of Rhodococcus equi with H-E, intracellular acid-fast bacteria were observed with Z-N in 3 tissues, and 4 samples were positive by qPCR. Fisher’s exact test was applied to correlate the results. No association was found between histopathological lesions detected with H-E staining, either for Leptospira spp. or Rhodococcus equi, and qPCR results. No association was found between S-S staining and qPCR either, but there was an association between Z-N staining and qPCR, with a p-value = 0.0351. These results allow partial acceptance of the hypothesis, since the presence of Rhodococcus equi could be confirmed by both histopathology and qPCR. However, Leptospira spp. was not detected by qPCR despite the presence of suggestive lesions in the histopathological analysis.